Цель. Обосновать перспективность применения противовирусного средства энисамия йодида (Нобазита) для регуляции ключевых воспалительных компонентов при острых респираторных инфекциях (ОРВИ), изучить роль циклооксигеназ (ЦОГ-1 и/или ЦОГ-2), транскрипционного ядерного фактора (NF-κB), трансформирующего ростового фактора (TGF1β), противовоспалительных цитокинов (интерлейкинов ИЛ-4, 10) и провоспалительных цитокинов ИЛ-1, 6, 8, фактора некроза опухоли альфа (ФНО-α) в реализации фармакологической активности этого препарата. Материалы и методы. Методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени определяли экспрессию генов, методом иммуноферментного анализа – концентрацию ИЛ, спектрофотометрическим методом (МТТ-тест) оценивали жизнеспособность мононуклеарной фракции крови (МНФК). Оксидантную активность МНФК оценивали хемилюминесцентным методом. Результаты. Энисамия йодид в концентрации 10 мкМ (соответствует рекомендованной терапевтической дозе при однократном приеме внутрь) снижал экспрессию генов, кодирующих ЦОГ-1, 2, NF-κB, TGF1β, ИЛ-1, 6, в стимулированных фитогемагглютинином МНФК здоровых доноров в среднем на 48% (р≤0,05). Повышение концентрации энисамия йодида до 50 мкМ не вызывало дальнейшего снижения экспрессии генов провоспалительных цитокинов. При этом энисамия йодид стимулировал секрецию мононуклеарами противовоспалительного цитокина ИЛ-10 в среднем на 20–50%. Энисамия йодид во всем диапазоне исследуемых концентраций (10–100 мкМ) не снижал жизнеспособность макрофагов, но ингибировал их оксидантную активность (максимальное значение интенсивности хемилюминесценции) в среднем на 55% (р≤0,05). Заключение. Противовоспалительное действие энисамия йодида может быть связано с ингибированием экспрессии генов, кодирующих ЦОГ-1, 2, NF-κB, ИЛ-1, 6, TGF1β, но увеличением экспрессии мРНК и продукции ИЛ-10. В противовоспалительную активность энисамия йодида дополнительный вклад вносит наличие у него антиоксидантной и антирадикальной активности. Отсутствие влияния эниcамия йодида (10–100 мкМ) на жизнеспособность МНФК свидетельствует о его безопасности для клеток иммунной системы, целесообразности использования для подавления воспалительных реакций при острых респираторных вирусных инфекциях, восстановления качества жизни пациентов и возможности применения Нобазита в качестве эффективного средства в терапии острых респираторных вирусных инфекций различной этиологии.
Ключевые слова: энисамия йодид, ЦОГ-1, ЦОГ-2, NF-κB, ИЛ-10, МНФК, антиоксидантная активность, in vitro, полимеразная цепная реакция, иммуноферментный анализ
________________________________________________
Aim. The role of cyclooxygenases (COX-1 and/or COX-2), transcription nuclear factor NF-κB, anti-inflammatory cytokines – TGF1b, IL-4, IL-10 and pro-inflammatory cytokines IL-1, IL-6 were studied to substantiate the expediency of antiviral agent enisamium iodide (Nobazit) using to regulate key inflammatory components in acute respiratory infections, IL-8, TNF-alpha in the realization of the pharmacological activity of this drug. Materials and methods. Gene expression was determined by real-time RT-PCR, the concentration of interleukins was determined by ELISA, and the viability of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) was assessed by the MTT spectrophotometric method. The chemiluminescence method was used to assess PBMC oxidant activity. Results. Enisamium iodide (10 μM) reduced mRNA levels of COX-1, COX-2, NF-κB, TGF1b, IL-1, IL-6 in stimulated PBMC of healthy donors by an average of 48% (p≤0.05). At 5 times higher concentration, 50 μM, enisamium iodide suppressed the expression of these genes by an average of 43% (p≤0.05). At a concentration of 100 μM, enisamium iodide reduced the expression of COX-2, TGF1b, IL-1, IL-6 by an average of 47% (p≤0.05). At a concentration of 10 μM, enisamium iodide stimulated the secretion of IL-10 by mononuclear cells by 1.2 times, p≤0.05. The tested drug at a concentration of 50 μM did not affected on the concentration of IL-1, IL-4, IL-8 and TNF-alpha, but significantly stimulated the production of IL-10 by 1.5 times, p≤0.05. The chemiluminescence method revealed that enisamium iodide in the entire concentration range (10–100 μM) does not reduce the viability of macrophages, but inhibits their oxidative activity (maximum value of CL intensity) by an average of 55% (p≤0.05). Conclusion. The anti-inflammatory effect of enisamium iodide at a concentration of 10 μM may be associated with inhibition of the expression of COX-1, 2, NF-κB, IL-1, IL-6, TGF1b and an increase in the expression and production of IL-10. An additional contribution to the anti-inflammatory activity of enisamium iodide is made by its antioxidant and antiradical activity. The absence of the effect of enisamium iodide (10–100 µM) on the viability of PBMC indicates its safety for the cells of the immune system and the expediency of using it to suppress inflammatory reactions in acute respiratory infections, restore the quality of life of patients and the possibility of using Nobazit as an effective agent for treatment of these infections of various etiologies.
1. Зарубаев В.В., Слита А.В., Синегубова Е.О., и др. Противовирусная активность энисамия йодида в отношении вирусов гриппа и ОРВИ in vitro на различных клеточных линиях. Терапевтический архив. 2020;92(11):45-50 [Zarubaev VV, Slita AV, Sinegubova EO, et al. Anti-viral activity of enisamium iodide against viruses of influenza and ARVI’s on different cell lines. Terapevticheskii Arkhiv (Ter Arkh.). 2020;92(11):45-50 (in Russian)]. DOI:10.26442/00403660.2020.11.000872
2. Государственный реестр лекарственных средств [Gosudarstvennyi reestr lekarstvennykh sredstv (in Russian)]. Режим доступа: https://grls.rosminzdrav.ru/ Ссылка активна на 10.11.2022.
3. Паевская О.А., Зуевская С.Н., Никифоров В.В., и др. Возможности этиотропной терапии в снижении рисков развития тяжелого или осложненного течения ОРВИ и гриппа. РМЖ. 2019;1(II):77-80 [Paevskaya OA, Zuevskaya SN, Nikiforov VV, et al. Etiotropic therapy possibilities for risk reduction during severe or complicated ARVI and influenza courses. RMJ. 2019;1(II):77-80 (in Russian)]
4. Пшеничная Н.Ю., Булгакова В.А., Волчкова Е.В., и др. Обзор текущих и перспективных направлений противовирусной терапии гриппа и острых респираторных вирусных инфекций в России. Терапевтический архив. 2019;91(11):105-9 [Pshenichnaya NY, Bulgakova VA, Volchkova EV, et al. Review of current and future directions of antiviral therapy of influenza and acute respiratory viral infections in Russia. Terapevticheskii Arkhiv (Ter Arkh.). 2019;91(11):105-9 (in Russian)]. DOI:10.26442/00403660.2019.11.000454
5. Фролов А.Ф., Фролов В.М., Бухтиарова Т.А., Даниленко В.Ф. Клинические аспекты применения Амизона. Украинский медицинский журнал. 2004;39(1):69-74 [Frolov AF, Frolov VM, Buhtiarova TA, Danilenko VF. Clinical aspects of Amizon application. Ukrainskij medicinskij zhurnal. 2004;39(1):69-74 (in Russian)].
6. Zupanets I, Zhulai T, Shebeko S, et al. Histomorphological Study of a New Nasal Spray with Anti-inflammatory Properties Efficacy in Rabbits with Rhinosinusitis. Med Arch. 2020;74(1):8. DOI:10.5455/medarh.2020.74.8-13
7. Zhulai TS. The preclinical study of a new nasal spray with the anti-inflammatory properties: the effect on the leukotriene-induced inflammation. Klìnìčna Farm. 2018;22(4):27-33. DOI:10.24959/cphj.18.1473
8. Зырянов С.К., Бутранова О.И., Гайдай Д.С., Крышень К.Л. Фармакотерапия острых респираторных инфекций, вызванных вирусами гриппа. Терапевтический архив. 2021;93(1):114-24 [Zyryanov SK, Butranova OI, Gaidai DS, Kryshen KL. Pharmacotherapy for acute respiratory infections caused by influenza viruses: current possibilities. Terapevticheskii Arkhiv (Ter Arkh.). 2021;93(1):114-24 (in Russian)]. DOI:10.26442/00403660.2021.01.200551
9. Ming O Li, Yisong Y Wan, Shomyseh Sanjabi, et al. Annu Rev Immunol. 2006;24:99-146. DOI:10.1146/annurev.immunol.24.021605.090737
10. Калашникова А.А., Ворошилова Т.М., Чиненова Л.В., и др. Субпопуляции моноцитов у здоровых лиц и у пациентов с сепсисом. Медицинская иммунология. 2018;6(20):815-24 [Kalashnikova AA, Voroshilova TM, Chinenova LV, et al. Monocyte subsets in healthy adults and sepsis patients. Medical Immunology. 2018;6(20):815-24 (in Russian)]. DOI:10.15789/1563-0625-2018-6-815-824
11. Mohsin S, Kurup GM, Mahadevan R. Effect of ascophyllan from brown algae Padina tetrastromatica on inflammation and oxidative stress in carrageenan-induced rats. Inflammation. 2013;36(6):1268-78. DOI:10.1007/s10753-013-9665-4
12. Asadullah K, Sterry W, Volk H D. Interleukin-10 therapy – review of a new approach. Pharmacol Rev. 2003;55(2):241-69. DOI:10.1124/pr.55.2.4
13. Vale ML, Marques JB, Moreira CA, et al. Antinociceptive effects of interleukin-4, -10, and -13 on the writhing response in mice and zymosan-induced knee joint incapacitation in rats. J Pharmacol Exp Ther. 200;304(1):102-8. DOI:10.1124/jpet.102.038703
14. Абатуров А.Е., Волосовец А.П., Юлиш Е.И. Участие интерлейкинового семейства 1 в развитии воспалительной реакции при инфекционном процессе. Здоровье ребенка. 2014;3(54):154-9 [Abaturov AYe, Volosovets AP, Yulish YeI. The participation of interleukin 1 family in the development of the inflammatory response in infectious process. Zdorov`e rebenka. 2014;3(54):154-9 (in Russian)].
15. Винник Ю.С., Савченко А.А., Перьянова О.В., и др. Клинические аспекты применения хемилюминесцентного анализа: научное издание. Сибирское медицинское обозрение. 2006;3:11-5 [Vinnik YuS, Savchenko AA, Per’yanova OV, et al. The clinical aspects of chemiluminescent analysis USE. Siberian Medical Review. 2006;3:11-5 (in Russian)].
________________________________________________
1. Zarubaev VV, Slita AV, Sinegubova EO, et al. Anti-viral activity of enisamium iodide against viruses of influenza and ARVI’s on different cell lines. Terapevticheskii Arkhiv (Ter Arkh.). 2020;92(11):45-50 (in Russian). DOI:10.26442/00403660.2020.11.000872
2. Gosudarstvennyi reestr lekarstvennykh sredstv (in Russian). Режим доступа: https://grls.rosminzdrav.ru/ Ссылка активна на 10.11.2022.
3. Paevskaya OA, Zuevskaya SN, Nikiforov VV, et al. Etiotropic therapy possibilities for risk reduction during severe or complicated ARVI and influenza courses. RMJ. 2019;1(II):77-80 (in Russian)
4. Pshenichnaya NY, Bulgakova VA, Volchkova EV, et al. Review of current and future directions of antiviral therapy of influenza and acute respiratory viral infections in Russia. Terapevticheskii Arkhiv (Ter Arkh.). 2019;91(11):105-9 (in Russian). DOI:10.26442/00403660.2019.11.000454
5. Frolov AF, Frolov VM, Buhtiarova TA, Danilenko VF. Clinical aspects of Amizon application. Ukrainskij medicinskij zhurnal. 2004;39(1):69-74 (in Russian).
6. Zupanets I, Zhulai T, Shebeko S, et al. Histomorphological Study of a New Nasal Spray with Anti-inflammatory Properties Efficacy in Rabbits with Rhinosinusitis. Med Arch. 2020;74(1):8. DOI:10.5455/medarh.2020.74.8-13
7. Zhulai TS. The preclinical study of a new nasal spray with the anti-inflammatory properties: the effect on the leukotriene-induced inflammation. Klìnìčna Farm. 2018;22(4):27-33. DOI:10.24959/cphj.18.1473
8. Zyryanov SK, Butranova OI, Gaidai DS, Kryshen KL. Pharmacotherapy for acute respiratory infections caused by influenza viruses: current possibilities. Terapevticheskii Arkhiv (Ter Arkh.). 2021;93(1):114-24 (in Russian). DOI:10.26442/00403660.2021.01.200551
9. Ming O Li, Yisong Y Wan, Shomyseh Sanjabi, et al. Annu Rev Immunol. 2006;24:99-146. DOI:10.1146/annurev.immunol.24.021605.090737
10. Kalashnikova AA, Voroshilova TM, Chinenova LV, et al. Monocyte subsets in healthy adults and sepsis patients. Medical Immunology. 2018;6(20):815-24 (in Russian). DOI:10.15789/1563-0625-2018-6-815-824
11. Mohsin S, Kurup GM, Mahadevan R. Effect of ascophyllan from brown algae Padina tetrastromatica on inflammation and oxidative stress in carrageenan-induced rats. Inflammation. 2013;36(6):1268-78. DOI:10.1007/s10753-013-9665-4
12. Asadullah K, Sterry W, Volk H D. Interleukin-10 therapy – review of a new approach. Pharmacol Rev. 2003;55(2):241-69. DOI:10.1124/pr.55.2.4
13. Vale ML, Marques JB, Moreira CA, et al. Antinociceptive effects of interleukin-4, -10, and -13 on the writhing response in mice and zymosan-induced knee joint incapacitation in rats. J Pharmacol Exp Ther. 200;304(1):102-8. DOI:10.1124/jpet.102.038703
14. Abaturov AYe, Volosovets AP, Yulish YeI. The participation of interleukin 1 family in the development of the inflammatory response in infectious process. Zdorov`e rebenka. 2014;3(54):154-9 (in Russian).
15. Vinnik YuS, Savchenko AA, Per’yanova OV, et al. The clinical aspects of chemiluminescent analysis USE. Siberian Medical Review. 2006;3:11-5 (in Russian).
1 ФГАОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва, Россия;
2 ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Россия
*tfedotcheva@mail.ru
________________________________________________
Elena N. Kareva1,2, Tatiana A. Fedotcheva*1, Aleksandr V. Semeikin1, Natalia A. Kochina1, Ekaterina V. Krasnoshchok1,2, Nikolai L. Shimanovskii1
1 Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia;
2 Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), Moscow, Russia
*tfedotcheva@mail.ru