Генотипическая стратификация риска острого нарушения мозгового кровообращения

Цель. Изучение ассоциации rs662799 гена APOA5 с развитием острого нарушения мозгового кровообращения (ОНМК) у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями (CCЗ) и факторами риска их развития. 
Материал и методы. Обследованы 260 пациентов с ОНМК (основная группа) и 272 пациента контрольной группы. Возрастной диапазон пациентов основной группы определен от 32 до 69 лет [57,0; 51,0–62,0], лица контрольной группы имели возраст от 37 до 68 лет [55,0; 51,0–62,0]. Распределение по полу лиц основной группы было следующим: 157 мужчин (возраст [56,5; 51,0–62,0]) и 103 женщины (возраст [57,0; 51,0–62,0]). Половозрастной состав лиц контрольной группы сопоставим с лицами основной группы: 170 мужчин (возраст [55,0; 51,0–62,0]) и 102 женщины (возраст [55,0; 51,0–62,0]). Методы исследования основной группы: клинический осмотр, компьютерная томография головного мозга, электрокардиография, эхокардиоскопия, ультразвуковое дуплексное сканирование экстракраниальных брахиоцефальных артерий (БЦА), суточное мониторирование артериального давления и сердечного ритма, анализ свертывающей системы крови. Контрольная группа нашего исследования – это популяционная выборка жителей г. Новосибирска, проходивших обследование по стандарту международного проекта HAPIEE. Обследование лиц контрольной группы включало анкетирование (социально-экономические условия жизни, хронические заболевания, уровень физической активности, состояние психического здоровья), антропометрию (рост, масса тела, объем талии, бедер), опрос о курении, потреблении алкоголя (частота и типичная доза), измерение артериального давления, оценку липидного профиля, опрос на выявление стенокардии напряжения (Rose), электрокардиограмму покоя в 12 отведениях, исследование респираторных и когнитивных функций. Всем пациентам основной и контрольной групп проводился молекулярно-генетический анализ венозной крови. Статистическая обработка материала проводилась с применением набора прикладных программ Statistica for Windows 7.0, Excel и SPSS 22.
Результаты. У 199 пациентов (123 мужчины и 76 женщин) основной группы наблюдался ишемический инсульт, у 51 пациента (28 мужчин и 23 женщины) диагностирован геморрагический инсульт, у 10 пациентов (6 мужчин и 4 женщины) выявлен смешанный тип ОНМК. Из 260 пациентов у 19 (13 мужчин и 6 женщин) имело место повторное ОНМК. Никто из обследуемых пациентов не имел клинических, анамнестических и инструментальных данных, свидетельствующих о наличии ишемической болезни сердца. Наиболее часто встречающимся ССЗ, предшествующим ОНМК, была артериальная гипертензия – АГ (249 человек, из них 153 мужчины и 96 женщин). Нарушения ритма сердца по типу пароксизмальных наджелудочковых тахикардий, в том числе фибрилляции предсердий, выявлены у 31 пациента (20 мужчин и 11 женщин). Среди факторов риска ОНМК в обследуемой группе пациентов наблюдались дислипидемия (159 пациентов, из них 95 мужчин и 64 женщины), атеросклероз БЦА (160 пациентов, из них 94 мужчины и 66 женщин), нарушения системы гемостаза в сторону гиперкоагуляции (90 пациентов, из них 53 мужчины и 37 женщин), 28 пациентов (19 мужчин и 9 женщин) имели отягощенный наследственный анамнез по ОНМК. В контрольной группе АГ диагностирована у 177 пациентов, из них 98 мужчин и 79 женщин. Другие ССЗ и факторы риска их развития на момент обследования в контрольной группе отсутствовали. Верифицировано статистически значимое преобладание носительства редкого генотипа GG и аллеля G среди больных с ОНМК по сравнению со здоровыми пациентами (4,7% пациентов в основной группе против 0,4% в группе контроля; р=0,001). Наряду с этим у больных с ОНМК определено статистически значимое снижение числа носителей распространенного генотипа АА и аллеля А по сравнению с контрольной группой (61,8%  в основной группе против 83,5% в группе контроля; р=0,000). В подгруппе мужчин с ОНМК статистически значимо реже встречался распространенный генотип АА (59,9%), чем среди мужчин группы контроля (82,9%; р=0,000; отношение шансов – ОШ 3,26, 95% доверительный интервал – ДИ 1,95–5,46). Генотип AG достоверно преобладал в подгруппе мужчин с ОНМК (33,6%), чем в контрольной группе мужчин (17,1%; р=0,001). Редкий генотип GG выявлен у 6,6% мужчин с ОНМК, а среди мужчин контрольной группы данный генотип отсутствовал (р=0,001). В подгруппе женщин с ОНМК статистически значимо чаще встречался генотип AG (33,3%), чем среди женщин группы контроля (14,7%; р=0,002). Генотип АА, напротив, достоверно преобладал в контрольной подгруппе женщин (84,3%) по сравнению с женщинами с ОНМК (64,7%; р=0,001; ОШ 2,93, 95% ДИ 1,49–5,75). В отношении генотипа GG статистически значимых различий не получено. Так, в подгруппе женщин с ОНМК генотип GG однонуклеотидного варианта rs662799 (A>G) встречался у 2,0% пациентов, в контрольной подгруппе женщин – у 1,0% (р=0,56). Нами проанализированы частоты генотипов и аллелей rs662799 (A>G) гена APOA5 среди пациентов с АГ, перенесших ОНМК, и лиц контрольной группы без АГ и ОНМК. Частота генотипа АА в подгруппе пациентов с АГ, перенесших ОНМК, составила 62,1%, в контрольной группе – 78,9% (р=0,003; ОШ 2,28, 95% ДИ 2,13–5,98). Генотип AG выявлен у 33,7% пациентов с АГ и ОНМК и у 21,1% лиц контрольной группы (р=0,022). Генотип GG в подгруппе пациентов с АГ и ОНМК встречался с частотой 4,1%, в контрольной группе отсутствовал (р=0,045). В подгруппе пациентов с дислипидемией и ОНМК установлено статистически значимое преобладание числа носителей генотипа AG (р=0,008) и снижение числа носителей генотипа АА (р=0,002; ОШ 2,11, 95% ДИ 1,32–3,38) по сравнению с контролем. В отношении генотипа GG статистически значимых различий, как и в подгруппе пациентов с атеросклерозом БЦА, не получено (р=0,05). Редкий аллель G статистически значимо чаще встречался среди пациентов с дислипидемией и ОНМК, чем среди лиц контрольной группы (р=0,001; ОШ 2,01, 95% ДИ 1,35–3,16). В подгруппе пациентов с нарушением в системе гемостаза, перенесших ОНМК, получены аналогичные результаты. Так, среди пациентов с гиперкоагуляцией частота носительства генотипа АА составила 63,8%, частота генотипа AG – 33,0%, частота генотипа GG – 2,3%. В подгруппе пациентов с нарушением гемостаза и ОНМК установлено статистически значимое преобладание числа носителей генотипа AG (р=0,001) и снижение числа носителей генотипа АА (р=0,000; ОШ 2,74, 95% ДИ 1,59–4,72) по сравнению с контролем. В отношении генотипа GG статистически значимых различий не получено (р=0,09). Носительство редкого аллеля G статистически значимо чаще встречалось среди пациентов с гиперкоагуляцией и ОНМК, чем среди контрольной группы (р=0,000; ОШ 2,50, 95% ДИ 1,54–4,05).
Заключение. Результаты нашего исследования свидетельствуют о необходимости дальнейшего исследования данного полиморфного варианта с целью изучения возможных механизмов его влияния на развитие ССЗ и цереброваскулярной патологии. Мы можем предполагать, что носительство генотипа AG и аллель G однонуклеотидного варианта rs662799 (A>G) повышают риск развития ОНМК у пациентов вне зависимости от предшествующих ССЗ и факторов риска, в том числе у пациентов с АГ, наджелудочковыми тахиаритмиями, атеросклерозом БЦА, нарушением липидного обмена и системы гемостаза. 

Ключевые слова: мозговое кровообращение, сердечно-сосудистые заболевания, генотипы, аллели, дислипидемия, гемостаз, артериальная гипертония, атеросклероз

________________________________________________

Aim. To study the association of rs662799 gene APOA5 with the development of Acute Cerebrovascular Event in patients with cardiovascular diseases (CVD) and their risk factors.
Material and methods. 260 Acute Cerebrovascular Event patients (main group) and 272 control group patients were examined. The age range of patients of the main group is defined from 32 to 69 years [57.0; 51.0–62.0], individuals in the control group were 37 to 68 years old [55.0; 51.0–62.0]. The distribution by sex of the main group was as follows: 157 men (age [56.5; 51.0–62.0]) and 103 women (age [57.0; 51.0–62.0]). The sex and age composition of the control group is comparable to those of the main group: 170 men (age [55.0; 51.0–62.0]) and 102 women (age [55.0; 51.0–62.0]). The main group's research methods were as follows: clinical examination, computed brain tomography, electrocardiography, echocardioscopy, ultrasound duplex scanning extracranial brachiocephalic arteries, daily monitoring of blood pressure and heart rate, blood coagulation system analysis. The control group of our study is a population sample of residents of Novosibirsk, who were examined according to the standard of the international HAPIEE project. Examination of individuals in the control group included: questionnaire (socio-economic living conditions, chronic diseases, level of physical activity, mental health), anthropometry (height, weight, waist volume, hips), survey on smoking, alcohol consumption (frequency and typical dose), blood pressure measurement, lipid profile assessment, stress angina detection (Rose) survey, resting electrocardiogram in 12 leads. All patients of the main and control groups underwent molecular genetic analysis of venous blood. Statistical processing of the material was carried out using the set of applications Statistica for Windows 7.0, Excel and SPSS 22.
Results. 199 patients (123 men and 76 women) of the main group had ischemic stroke, 51 patients (28 men and 23 women) were diagnosed with hemorrhagic stroke, 10 patients (6 men and 4 women) showed a mixed type of Acute Cerebrovascular Event. Of the 260 patients, 19 (13 men and 6 women) had repeated Acute Cerebrovascular Event. None of the patients examined had clinical, anamnestic and instrumental evidence suggesting the presence of CVD. The most common CVD preceding Acute Cerebrovascular Event was arterial hypertension – AH (249 people, 153 of them men and 96 women). Heart rhythm disorders by type of paroxysmal supraventricular tachycardia, including atrial fibrillation, were detected in 31 patients (20 men and 11 women). Among the risk factors for Acute Cerebrovascular Event in the patient group surveyed, dyslipidemia was observed (159 patients, 95 men and 64 women), atherosclerosis of brachiocephalic artery (160 patients, 94  men and 66 women), disorders of the hemostasis system towards hypercoagulation (90 patients, 53 of them men and 37 women), 28 patients (19 men and 9 women) had an aggravated hereditary history according to Acute Cerebrovascular Event. In the control group, AH was diagnosed in 177 patients, of which 98 were men and 79 were women. Other CVD and their risk factors were absent in the control group at the time of the survey. The statistically significant prevalence of rare GG genotype and G allele wearability among Acute Cerebrovascular Event patients compared to healthy patients was verified (4.7% of patients in the main group versus 0.4% in the control group; p=0.001). In addition, a statistically significant decrease in the number of carriers of the advanced AA genotype and allele A compared to the control group (61.8% in the main group versus 61.5% in the control group, р=0.000) was determined in patients with Acute Cerebrovascular Event. In the subgroup of men with Acute Cerebrovascular Event, the common AA genotype was statistically significantly less common (59.9%) than among men in the control groups (82.9%; р=0.000; odds ratio – OR 3.26, 95% confidence interval – СI 1.95–5.46). The AG genotype was significantly predominant in the subgroup of men with Acute Cerebrovascular Event (33.6%), than in the control group of men (17.1%; р=0.001). A rare GG genotype was detected in 6.6% of men with Acute Cerebrovascular Event, and among men in the control group, this genotype was absent (р=0.001). In the subgroup of women with Acute Cerebrovascular Event, the AG genotype was statistically more common (33.3%) than among women in the control group (14.7%; р=0.002). The AA genotype, in contrast, significantly predominated in the control subgroup of women (84.3%) compared to women with Acute Cerebrovascular Event (64.7%; р=0.001; OR 2.93, 95% СI 1.49–5.75). No statistically significant differences were obtained with respect to the GG genotype. Thus, in the subgroup of women with Acute Cerebrovascular Event, the GG genotype of ONV rs662799 (A>G) occurred in 2.0% of patients, in the control subgroup of women – in 1.0% (р=0.56). We analyzed the frequencies of the genotypes and alleles rs662799 (A>G) of the APOA5 gene among patients with AH undergoing Acute Cerebrovascular Event and individuals in the control group without AH and Acute Cerebrovascular Event. The frequency of the AA genotype in the subgroup of AH patients undergoing Acute Cerebrovascular Event was 62.1%, in the control group – 78.9% (р=0.003; OR 2.28, 95% CI 2.13–5.98). The AG genotype was detected in 33.7% of patients with AH and Acute Cerebrovascular Event and in 21.1% of individuals in the control group (р=0.022). The GG genotype in the subgroup of patients with AH and Acute Cerebrovascular Event occurred at a frequency of 4.1%, was absent in the control group (р=0.045). In the subgroup of patients with dyslipidemia and Acute Cerebrovascular Event, a statistically significant predominance of the number of AG genotype carriers (р=0.008) and a decrease in the number of AA genotype carriers (р=0.002; OR 2.11, 95% CI 1.32–3.38) compared to control. With respect to the GG genotype, no statistically significant differences were obtained as in the subgroup of patients with brachiocephalic artery atherosclerosis (р=0.05). The rare G allele was statistically significantly more common among patients with dyslipidemia and Acute Cerebrovascular Event than among the control group (р=0.001; OR 2.01, 95% CI 1.35–3.16). In a subset of patients with impairment in the hemostasis system who underwent Acute Cerebrovascular Event, similar results were obtained. So, among patients with hypercoagulation, the frequency of carrying the AA genotype was 63.8%, the frequency of the AG genotype was 33.0%, and the frequency of the GG genotype was 2.3%. In a subgroup of patients with impaired hemostasis and Acute Cerebrovascular Event, a statistically significant predominance of the number of AH genotype carriers (р=0.001) and a decrease in the number of AA genotype carriers (р=0.000; OR 2.74, 95% CI 1.59–4.72) compared to control. No statistically significant differences were obtained with respect to the GG genotype (р=0.09). The wearing of the rare G allele was statistically significantly more common among patients with hypercoagulation and Acute Cerebrovascular Event than among the control group (р=0.000; OR 2.50, 95% CI 1.54–4.05).
Conclusion. The results of our study suggest the need for further investigation of this polymorphic variant in order to study the possible mechanisms of its influence on the development of CVD and cerebrovascular pathology. We may suggest that the wearing of the AG genotype and the G allele rs662799 (A>G) increase the risk of Acute Cerebrovascular Event in patients regardless of previous CVD and risk factors, including those with AH, supra-ventricular tachyarrhythmias, brachiocephalic artery atherosclerosis, impaired lipid metabolism and hemostasis systems.

Keywords: cerebral circulation, cardiovascular diseases, genotypes, alleles, dyslipidemia, hemostasis, arterial hypertension, atherosclerosis