Фундаментальные основы использования биорезорбируемых микроносителей на основе фиброина шелка в терапевтической практике на примере регенерации кожи
Фундаментальные основы использования биорезорбируемых микроносителей на основе фиброина шелка в терапевтической практике на примере регенерации кожи
Мойсенович М. М., Куликов Д. А., Архипова А. Ю., Малюченко Н. В., Котлярова М. С., Гончаренко А. В., Куликов А. В., Машков А. Е., Агапов И. И., Палеев Ф. Н., Свистунов А. А., Кирпичников М. П. Фундаментальные основы использования биорезорбируемых микроносителей на основе фиброина шелка в терапевтической практике на примере регенерации кожи. Терапевтический архив. 2015;87(12):66-72. https://doi.org/10.17116/terarkh2015871266-72
Фундаментальные основы использования биорезорбируемых микроносителей на основе фиброина шелка в терапевтической практике на примере регенерации кожи
Мойсенович М. М., Куликов Д. А., Архипова А. Ю., Малюченко Н. В., Котлярова М. С., Гончаренко А. В., Куликов А. В., Машков А. Е., Агапов И. И., Палеев Ф. Н., Свистунов А. А., Кирпичников М. П. Фундаментальные основы использования биорезорбируемых микроносителей на основе фиброина шелка в терапевтической практике на примере регенерации кожи. Терапевтический архив. 2015;87(12):66-72. https://doi.org/10.17116/terarkh2015871266-72
Цель исследования. Оценка возможности использования микроносителей (МН) на основе фиброина шелка для культивирования фибробластов (ФБ) и кератиноцитов (КЦ) — ключевых клеточных компонентов в регенерации повреждений кожи. Материалы и методы. МН получали криоизмельчением из фиброиновых и композитных матриксов на основе фиброина с 30% содержанием желатина. Для исследования структуры матриксов и МН методом конфокальной микроскопии конъюгировали полимер с красителем тетраметилродаминизотиоцианат. Распределение микрочастиц по размеру оценивали посредством гранулометрического анализа. В целях изучения пригодности МН на основе фиброина для культивирования клеток, участвующих в регенерации кожи, использовали мышиные ФБ линии 3Т3 и первичную культуру КЦ мыши, экспрессирующих зеленый флуоресцентный белок (GFP). Рост КЦ анализировали методом конфокальной лазерной сканирующей микроскопии по флуоресценции GFP, экспрессируемого клетками. Скорость пролиферации ФБ и КЦ оценивали методом МТТ-теста. Результаты. Получены два типа МН: на основе фиброина и композитные, содержащие фиброин и 30% желатин. На фиброиновых МН без желатина ФБ клеточной линии 3Т3, начиная с 1-го дня, активно пролиферировали, а наличие желатина в МН снижало пролиферацию таких клеток. Показано, что фиброиновые МН пригодны для эффективного культивирования in vitro КЦ, экспрессирующих цитокератины-5 и -14 — основные маркеры КЦ базального слоя. Желатин не приводил к ускорению роста КЦ. Продемонстрирована возможность регуляции пролиферации ФБ на МН, что имеет большое значение при доставке клеток в область повреждения, поскольку интенсивная пролиферация ФБ может приводить к развитию фиброза и формированию рубцовых тканей. Сбалансированный рост ФБ важен для создания оптимальных условий роста КЦ в композитных тканеинженерных конструкциях. Заключение. Применение фиброиновых МН перспективно для разработки новых терапевтических материалов и инъекционной клеточной терапии различных патологий.
1 ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова», Москва, Россия
2 ГБУЗ Московской области «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского», Москва, Россия
3 ФГБУ «ФНЦ трансплантологии и искусственных органов им. акад. В.И. Шумакова» Минздрава России, Москва, Россия
4 Биологический факультет ФГБО ВПО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова», ул. Ленинские горы, 1, стр. 12, Москва, Российская Федерация, 119234
5 ФГБН «Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова» РАН, ул. Миклухо-Маклая, 16/10, Москва, Российская Федерация, 117997